切片的注意事項
來源:http://www.archozlandscape.com/news/523.html 發(fā)布時間:2021-04-02 點擊:1605
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今天小編為你解析:
1 . 取材
取材的好壞,直接影響切片的質(zhì)量。醫(yī)生在取材時,首先要有一把鋒利的取材刀,在切割組織時要避免取材刀來回拖拉,切取的組織塊厚薄要均勻,一般厚度以0.2 ~0.3cm 為適,較容易發(fā)脆的組織如甲狀腺、肝臟、血塊、淋巴結(jié)、大塊癌組織等可適當厚一點,而脂肪組織、肺組織、纖維性腫瘤、平滑肌瘤等致密的或試劑不易滲入的組織應取薄一些;淋巴結(jié)應修掉兩側(cè)球冠,并盡量剔除周圍的脂肪組織。在取材中還應十分注意組織內(nèi)是否有縫線或骨組織,如碰到不可避免的鈣化組織,應與技術室講明,在切取纖維組織、肌肉組織、胃腸道時,應注意纖維及肌肉的走向,取材時盡可能按與纖維平行走向切取為佳。
2 . 固定
固定是技術室工作的一步,也是在整個制片過程中無法補救的一步。所謂“固定”,就是組織離體后,用各種辦法使其細胞內(nèi)的物質(zhì)盡量接近其生活狀態(tài)時的形態(tài)結(jié)構(gòu)和位置的過程。固定的目的是為了防止組織細胞自溶與腐敗,防止了細胞內(nèi)的酶對蛋白質(zhì)的分解作用,使細胞內(nèi)的各種成分如蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物或酶類轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì),以保持原有的結(jié)構(gòu)與生活時相仿。另外,組織固定后,均呈一定的硬化狀態(tài),增加組織韌性,而且不易變形,有利于以后的組織處理。所以組織一旦離體必需及時固定,固定液的量應為組織的5 倍。固定的關鍵主要與固定的及時性、固定液的選擇、固定液的濃度、固定的溫度和時間有關。常用的固定液為10%福爾馬林。筆者認為,10%福爾馬林由于受到福爾馬林的質(zhì)量、使用時的揮發(fā)和取材時帶入的水分影響,濃度被降低致組織固定不足,而高濃度的福爾馬林,降低了對組織的穿透性,形成周圍固定好而中央固定不到的現(xiàn)象。通過實踐,本人認為以酸性12~15%的福爾馬林。大標本(2cm 厚)一般需要6~12個小時,小標本一般需要3~6 個小時;當室溫低18℃時,可在37℃以下的溫箱內(nèi)加溫4~6 個小時。由于HE 染色著色PH為3.5~4.5, 中性福爾馬林對蘇木素染色有一定影響,細胞核容易發(fā)灰,核染色質(zhì)不佳。
所以, 盡管中性福爾馬林對抗原有很好的保存作用,但酸性福爾馬林對絕大多數(shù)抗原來說也有很好的保存作用,所以在沒有特別處理的情況下常規(guī)HE 用12~15%酸性福爾馬林也可以(每100毫升12~15%福爾馬林液內(nèi)加5毫升冰醋酸)。骨髓、結(jié)締組織固定以Bouin 液為佳,經(jīng)Bouin 液固定后的組織必須流水沖洗4 小時以上。有條件的單位可根據(jù)不同要求選用二種或二種以上的固定液;少數(shù)單位還可建立組織冷凍庫,以便適應各種特殊的處理要求。
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