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病理組織切片制作

來源:http://www.archozlandscape.com/news/454.html    發(fā)布時間:2020-12-25    點擊:1892

  一、實驗?zāi)康慕M織切片技術(shù)是病理學(xué)中不可缺少的一個組成部分。通過實驗,能夠使學(xué)生了解和掌握病理組織切片的基本方法之一,即石蠟包埋的組織切片法。

    二、實驗原理根據(jù)病變及檢查的要求,合理采集病料,經(jīng)固定、脫水、透明、浸蠟、包埋后進(jìn)行切片,在進(jìn)行染色得到結(jié)論。

  一、實驗?zāi)康?/p>

  組織切片技術(shù)是病理學(xué)中不可缺少的一個組成部分。通過實驗,能夠使學(xué)生了解和掌握病理組織切片的基本方法之一,即石蠟包埋的組織切片法。


  二、實驗原理

  根據(jù)病變及檢查的要求,合理采集病料,經(jīng)固定、脫水、透明、浸蠟、包埋后進(jìn)行切片,在進(jìn)行染色得到結(jié)果。固定是用化學(xué)藥品把組織原來的結(jié)構(gòu)保存下來,以便觀察。脫水是除去組織中的水分,以利于透明和浸蠟。組織的透明是便于透蠟包埋。包埋的是使石蠟透入組織內(nèi)部,把軟組織變?yōu)檫m當(dāng)硬度的包埋塊,以便切成薄片。***后使用切片機(jī),將包埋塊中組織切成薄片。

  三、主要儀器及試材

  已固定好病料,石蠟,手術(shù)刀,手術(shù)剪,鑷子,脫水框,染色缸,梯度脫水酒精和透明劑一套,烘箱,切片機(jī),毛筆,玻片,蛋白甘油,染色架,酒精燈,三角架,大燒杯,溫度計,火柴,切片刀,記號筆或鉛筆。

  四、實驗方法與步驟。

  (一)固定

  采取的病理材料必須立即放入10%福爾馬林固定液中。

  (二)脫水


  組織經(jīng)固定后,尚含有多量水分,而水與透明劑苯、石蠟根本不相融合。必須先把組織中的水分除去。但脫水劑必須是與水在任何比率下均能混合的液體,脫水劑常兼有硬化組織的作用。***常用的脫水劑為酒精、丙酮等。

  1.酒精 沸點78.4℃,為***常用的脫水劑。脫水能力強(qiáng),并能使組織硬化,能較好地與二甲苯透明劑相混合。***終結(jié)果表明,只要脫水環(huán)節(jié)處理好,都會得到好的切片。脫水的程序為70%一80%一95%一100%。各級酒精2—4小時,視材料的大小、厚薄而定。100%酒精有硬化組織的作用,時間不宜太長,一般不超過3小時。腦組織、脂肪組織或疏松結(jié)締組織,脫水時間要適當(dāng)延長。

  2.丙酮 沸點為56℃。脫水作用比乙醇強(qiáng),但對組織塊的收縮較大,主要用于快速脫水或固定兼脫水。脫水時間l一3小時左右。  

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  透明對組織有脫酒精及透明兩種作用。當(dāng)組織中全部為透明劑占有時,

  光線可以透過,組織可呈現(xiàn)不同程度的透明狀態(tài),此種現(xiàn)象稱為透明,具有這種作用的試劑稱為透明劑。常用的透明劑有:

  1.二甲苯 是***常用的良好透明劑,不影響各種染色。二甲苯易溶于酒精,能溶解石蠟,也是封固劑,不吸收水,透明能力強(qiáng),易使組織收縮、變脆,故組織塊在二甲苯中不宜久留,特別對小動物組織材料必須嚴(yán)格控制好(各種器官的透明差異很大),通常為半小時到1小時左右。

  當(dāng)二甲苯透明時必須持組織放在專用二甲苯皿器中,這樣可減少透明時間,有利于組織透明徹底,在換組織塊透明時候,所用的鑷子等器具必須干燥,不得將水滴混入二甲苯中,因水滴易被組織吸收而影響透明程度,潮濕天氣更應(yīng)引起注意。

  2.冬青油(水楊酸甲酯)為無色油樣液體,易溶于醇、醚及冰醋酸,難溶于水。透明速度較慢,數(shù)小時或數(shù)天。一般經(jīng)無水乙醇脫水后再入冬青油。

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